محیط کشت EMB آگار لیوفیلکم ایتالیا

ائوزین متیلن بلو (EMB ، همچنین به عنوان “Levine’s formulation” شناخته می شود) یک رنگ انتخابی برای باکتریهای گرم منفی است. EMB حاوی رنگ هایی است که نسبت به باکتری های گرم مثبت سمی هستند.

EMB یک محیط انتخابی و افتراقی برای کلی فرم است. این ترکیبی از دو رنگ ائوزین و متیلن بلو به نسبت 6 به 1 است.

ائوزین متیلن بلو یک محیط میکروبیولوژیکی افتراقی است که کمی از رشد باکتری های گرم مثبت جلوگیری می کند و یک شاخص رنگی را از ارگانیسم هایی که لاکتوز را تخمیر می کنند (به عنوان مثال E. coli) و آنهایی که این کار را نمی کنند (مانند سالمونلا شیگلا) فراهم می کند. تنوع زیادی از محیط کشت ها وجود دارد، پیشنهاد میکنیم حتماً به صفحه ی محیط کشت میکروبی رفته و این تنوع را بررسی نمایید.

ارگانیسم هایی که لاکتوز را تخمیر می کنند “کلنی های هسته دار” را نشان می دهند – کلنی هایی با مراکز تاریک. این محیط در آزمایشگاه های پزشکی با تشخیص میکروب های بیماری زا در مدت زمانی کوتاه، از اهمیت بالایی برخوردار است.

 

 

 

ترکیبات تشکیل دهنده ی محیط کشت EMB آگار

 

رنگ ائوزین از رشد باکتری گرم مثبت جلوگیری می کند و با اندیکاتور متیلن بلو ترکیب می شود تا هنگامی که لاکتوز یا ساکاروز تخمیر می شوند تغییر رنگ ایجاد کند.

این محیط اجازه  نمی دهد که بین تخمیر کربوهیدرات ها تبعیضی اعمال شود. Yersinia enterocolitica که ساکاروز را تخمیر می کند ولی لاکتوز را تخمیر نمی کند، همان کلنی بنفش-مشکی رنگی را تولید می کند که باکتری تخمیر کننده ی لاکتوز تولید می کند.

 

پپتون	۱۰
لاکتوز	۵
ساکاروز	۵
پتاسیم فسفات بی بازیک	۲
ائوزین وای	۰٫۴
متیلن بلو	۰٫۰۶۶
آگار	۱۵

 

مقادیر در جدول بالا بر حسب گرم بر لیتر و طبق اعلام شرکت لیوفیلکم ایتالیا است.

مقدار PH برابر با 7.1±0.2 می باشد.

 

روش تهیه ی محیط کشت EMB

 

روش تهیه ی این محیط کشت عمومی بسیار آسان است. فقط ترازو، اتوکلاو، آب مقطر و پتری دیش فراموش نشود. خیلی مهم است که پلیت شما از قبل استریل باشد. توصیه میکنیم برای داشتن پلیت خوب و با کیفیت حتماً به صفحه ی پتری دیش پلاستیکی مراجعه نمایید و سایز مورد نظر را انتخاب کنید.

• ۳۸گرم از پودر را در یک لیتر آب مقطر استریل و یا آب دیونیزه بریزید.
• آن را حرارت دهید تا کاملاً حل شود.
• در اتوکلاو، به مدت ۱۵ دقیقه در دمای ۱۲۱ درجه قرار دهید تا استریل شود.
• در پتری دیش ها توزیع کنید و بگذارید تا جامد شود.

نمونه ی مدفوع و یا سواپ مقعدی را بر روی ناحیه ی کوچکی از پلیت قرار دهید و به منظور جداسازی، خط بکشید.

به مدت ۱۸ الی ۲۴ ساعت در انکوباتور 36±1 درجه قرار دهید و کلنی ها را با کمک روش های مورفولوژی در مورد عوامل بیماری زای احتمالی بررسی نمایید.

 

گزارش کار محیط کشت EMB

 

اشرشیاکلی: آبی- مشکی، کلنی با مرکز تیره و رنگ براق متالیک سبز

انواع سالمونلا: بی رنگ یا شفاف، دارای کلنی هایی با رنگ بنفش روشن.

انواع Klebsiella: کلنی مخاطی شکل با رنگ قهوه ای دارای مرکزی با رنگ آبی-مشکی.

انواع پروتئوس: صاف و صیقلی، نیمه شفاف و مات، کلنی های بی رنگ.

نگهداری این محیط در دمای ۱۰ الی ۳۰ درجه سانتی گراد و به دور از نور خورشید است.

 

محیط کشت EMB چه رنگی است؟

 

ظاهر محیط در حالت دهیدراته بصورت قرمز مایل به صورتی است و محیط آماده هم کمی کدر است و رنگ قرمز شرابی دارد.

 

 

 

میکروارگانیسم	ATCC	رشد	ویژگی ها
Enterococcus faecalis	۱۹۴۳۳	ممانعت جزئی	کلنی های بی رنگ
Escherichia coli	۲۵۹۲۲	خوب	کلنی های آبی/مشکی با مراکز مشکی و رنگ درخشان متالیک
Salmonella typhimurium	۱۴۰۲۸	خوب	کلنی های بی رنگ