محیط کشت اندو آگار ایبرسکو
- ارسال توسط شیمی بیو
- ارسال توسط شیمی بیواین کالا پس از مدت زمان مشخص شده توسط فروشنده در انبار شیمی بیو تامین و آماده پردازش میگردد و توسط پیک شیمی بیو در بازه انتخابی ارسال خواهد شد.
توضیحات
اندوآگار یک محیط کشت میکروبیولوژی است که رنگ آن صورتی کمرنگ می باشد. این محیط کشت در اصل جهت جداسازی سالمونلای تیپ i توسعه داده شده بود. ولی امروزه اغلب به عنوان محیط کشت کلیفرم کاربرد دارد.
اکثر ارگانیسم های گرم منفی، در این محیط کشت، بخوبی رشد می کنند در حالی که رشد ارگانیسم های گرم منفی به سختی انجام می شود. ارگانیسم های کلیفرم در این محیط کشت، لاکتوز را تخمیر می کنند و یک کلنی سبز رنگ متالیک براق به وجود می آورند. این در حالیست که ارگانیسم هایی که لاکتوز را تخمیر نمی کنند کلنی های شفاف و بدون رنگ تولید می کنند.
بیشتر محیط کشت های مربوط به روده که در سال های اولیه ی قرن بیستم تولید شدند، از ترکیبی از نمک های صفراوی بهره بردند و یا از نمک های اختصاصی به عنوان عوامل انتخابی جهت دستیابی به مانعی برای انواع گرم مثبت استفاده می کردند. کردند.
در سال 1904 دانشمندی به نام ENDO، یک محیط کشت توسعه یافته را معرفی کرد که بدون استفاده از نمک های صفراوی بتوان تفاوت بین مخمرهای لاکتوز و غیر مخمرها راتشخیص داد.
کاربرد اصلی این محیط کشت افتراقی، تایید، تشخیص و شمارش باکتری کلیفرم بر طبق تست آب نوشیدنی است. از کاربردهای دیگر این محیط کشت می توان تشخیص و ایزوله کردن کلیفرم ها و کلیفرم های مدفوعی از شیر، محصولات لبنی و مواد غذایی را نام برد.
ترکیبات ENDO agar چیست؟
دی سدیم سولفیت و فوشین از رشد باکتری گرم مثبت E.Coli جلوگیری می کنند.
باکتری کلیفرم لاکتوز را از طریق متابولیز تغییر می دهد. این کار با تولید آلدئید و اسید انجام می شود.
آلدئید هم فوشین را از ترکیب فوشین سولفیت تجزیه می کند و فوشین هم کلنی ها را به رنگ قرمز در می آورد.
در مورد E.Coli این واکنش به قدری قوی است که فوشین کریستال می شود و به کلنی ها رنگ سبز متالیک براق می دهد.
در حالت عمومی و رایج ترکیبات اندوآگار به ترتیب زیر می باشد:
این ارقام بر حسب گرم بر لیتر هستند
پپتون | 1 درصد |
پتاسیم دی هیدروژن فسفات | 0.25 درصد |
لاکتوز | 1 درصد |
دی سدیم سولفیت خشک | 0.33 درصد |
فوشین | 0.03 درص |
آگار | 1.25 درصد |
طرز تهیه محیط کشت اندو آگار
روش آماده سازی محیط کشت اندو آگار به شرح ذیل است:
- اول ۳۹ گرم از پودر محیط کشت اندوآگار را در 1000 میلی لیتر آب مقطر یا آب دیونیزه خالص بریزید.
- سپس آن را به مدت یک ربع و در دمای ۱۲۱ درجه سانتی گراد با رعایت نکات ایمنی اتوکلاو کنید.
- آن ها را در پتری دیش بریزید.
- اگر محیط کشت پس از تبدیل شدن به حالت جامد، رنگ قرمز شدید بود می توانید با افزودن چند قطره از محلول آماده ی ۱۰% سدیم سولفیت و سپس جوشاندن آن این مشکل را برطرف کنید.
- در پایان انتظار داریم که PH آن در دمای ۲۵ درجه سانتی گراد حدود ۷٫۴ با تلرانس ۰٫۲ باشد.
گزارش کار محیط کشت اندوآگار
پلیت ها را با روش Streak plate کشت دهید.
به مدت ۲۴ ساعت در دمای ۳۵ درجه سانتی گراد در انکوباتور قرار دهید.
شکل ظاهری محیط:
ظاهر کلنی ها | میکروارگانیسم ها |
قرمز | لاکتوز مثبت |
قرمز به همراه براقیت متالیک پایدار | اشرشیاکلی |
قرمز و یا مایل به قرمز، نیم کره ای، مخاطی | آئروژن های انتروباکتر، Klebsiella و سایر |
شفاف، بدون رنگ | لاکتوز منفی |
کنترل کیفی:
سوش های تست | رشد | تغییر رنگ به قرمز | درخشندگی متالیک |
اشرشیاکلی ATCC25922 | خوب/خیلی خوب | + | + |
اشرشیاکلی ۱۹۴ | خوب/خیلی خوب | + | + |
اشرشیاکلی ATCC11775 | خوب/خیلی خوب | + | + |
Enterobacter cloacae ATCC 13047 | خوب/خیلی خوب | + (ضعیف) | ± |
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 | خوب/خیلی خوب | + | خیر/ضعیف |
Salmonella typhimurium ATCC 14028 | خوب/خیلی خوب | – | – |
Shigella flexneri ATCC 12022 | خوب/خیلی خوب | – | – |
Proteus mirabilis ATCC 14153 | خوب/خیلی خوب | – | – |
Enterococcus faecalis ATCC 11700 | خیر/متوسط | – | – |
رشد محیط کشت خود را بر روی این پتری دیش ها با رشد محیط کشت هایی که جهت کاربری عمومی هستند مقایسه کنید. اگر بر روی محیط های کشت عمومی رشدی نداشتید، نتایج خود را ابطال کنید و آزمایش را از اول تکرار کنید.
به دنبال ظهور و یا غیاب رشد باشید و اینکه آیا رشد وجود دارد؟ حتی کمتر از حالت نرمال. اگر رشد وجود دارد، بررسی نمایید که آیا رشد صورتی است یا قرمز؟
فردی پیش بینی کرده بود که اگر ارگانیسم به خوبی بر روی اندوآگار رشد کند، به احتمال خیلی زیاد گرم منفی است در غیر این صورت احتمالاً گرم مثبت است و همچنین اگر رشد خوب است و قرمز/صورتی است به احتمال خیلی زیاد یک کلیفرم است.
همچنین بررسی نمایید که آیا کلیفرم ها براقیت متالیک دارند؟ اگر داشته باشند ارگانیسم ها به شدت از لاکتوز استفاده می کنند.
اتفاقاً یک فرق عمده بین کولیفرم و غیر کولیفرم در خانواده ی Enterobacteriaceae در صورتی است که بتواند لاکتوز را متابولیزه کند.
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.