Oil Red O بایوآیدیا

رنگ Oil Red O بایوآیدیا، یک لیزوکروم محلول در چربی است که برای رنگ‌آمیزی لیپیدها، اسیدهای چرب، تری‌گلیسریدها و کلسترول‌ها در نمونه‌های بافتی و کشت سلولی استفاده می‌شود.

این رنگ به دلیل حلالیت بالا در مواد چربی و شدت رنگ قرمز خود، یکی از بهترین گزینه‌ها برای شناسایی سلول‌های چربی و بررسی تمایز آدیپوژنیک است.

در کشت سلول، از این رنگ برای مشاهده و شمارش سلول‌های چربی تمایز‌یافته (Adipocytes) استفاده می‌شود.

ساختارهای سلولی پس از رنگ‌آمیزی واضح باقی می‌مانند و به‌خاطر خاصیت فلورسانس، سلول‌ها در زیر نور قرمز قابل مشاهده هستند.

در کشت سلول، قطعاً با محیط های کشت سلولی سر و کار دارید. توصیه می کنیم با کلیک بر روی لینک آن ها را بررسی نمایید.

ویژگی‌های رنگ Oil Red O بایوآیدیا

کاربردهای Oil Red O بایوآیدیا

1. رنگ‌آمیزی بافت‌های چربی

برای مشاهده قطرات چربی، کلسترول و فسفولیپیدها در برش‌های بافتی یا نمونه‌های منجمد از رنگ Oil Red O استفاده می‌شود.
در پروسه ی رنگ آمیزی بافت ها، استفاده از فرمالین 10% دکتر مجللی بسیار متداول و رایج است.

2. شناسایی آدیپوسیت‌ها در کشت سلولی

در آزمایش‌های تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی (MSC)، این رنگ برای تعیین میزان تمایز به سلول‌های چربی به کار می‌رود.
در مورد ظروف کشت سلولی، میکروپلیت های کشت بسیار در این کاربری، استفاده می شوند.
همچنین اگر از مواد کشت بخواهیم بگوییم، سرم FBS 100 میلی بایوآیدیا و محلول PBS هم در این شناسایی ها کاربرد دارند.

3. بررسی کمی میزان چربی سلولی

پس از رنگ‌آمیزی، رنگ از سلول‌ها استخراج می‌شود و جذب نوری در طول موج 500 نانومتر اندازه‌گیری می‌شود تا میزان تجمع چربی تعیین شود.
در این بررسی، فالکون 15 میلی SPL و در حجم های بیشتر، فالکون 50 میلی SPL استفاده می شوند.

روش آماده‌سازی محلول Oil Red O بایوآیدیا

برای تهیه محلول کاری:

6 قسمت از محلول ذخیره اصلی (Stock Solution) را با 4 قسمت آب مقطر مخلوط کنید.

مخلوط را 20 دقیقه در دمای اتاق قرار دهید تا آماده مصرف شود.

روش استفاده

1. سلول‌ها را در پلیت کشت 35 میلی‌متری رشد دهید.

2. محیط کشت را خارج کرده و سلول‌ها را با 2 mL PBS شستشو دهید.

3. 2 mL فرمالین 10% اضافه کنید و 10 دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید.

4. مجدداً فرمالین تازه اضافه کرده و برای حداقل 1 ساعت انکوبه نمایید.

5. سلول‌ها را دو بار با آب مقطر شستشو دهید.

6. با ایزوپروپانول 60% به مدت 5 دقیقه بشویید.
   در این مرحله، علاوه بر Oil Red O بایوآیدیا، ایزوپروپانول اکسترا پیور دکتر مجللی مورد نیاز است.

7. سلول‌ها را خشک کرده و 1 mL محلول کاری Oil Red O بایوآیدیا اضافه کنید.

8. 10 دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید.

9. رنگ را خارج کرده و سلول‌ها را چهار بار با آب مقطر بشویید.

10. برای مشاهده زیر میکروسکوپ آماده است.

11. برای استخراج رنگ، ایزوپروپانول 100% اضافه کنید و جذب را در 500 nm بخوانید.